实验步骤简单如下：
SOFIA with Rolling circle DNA amplification (T4 ligase normal standard)
1. Coat plate with : Anti-GFAP antibody.
2. block
3. serum（14samples）
4. Biotin-anti GFAP antibody.
5. Streptavidin
6. Primer: biotin-prostate-primer
7. T4 ligase
PEG4000
phos-template
8.ф29 DNA polymerase buffer
BSA
each DATP,DGTP,DCTP
DTTP+DUTP-Texas Red
ф29 DNA polymerase
PBS
9. 1 N NaOH
10. Laser test
今天的试验，神出鬼没，试验plate孔内的1 N NaOH 100ul凭空消失，匪夷所思，百思不得其解。
Plate 1
Plate 1, C 和E的3，4,5,6,7,8,9，是样品1，2,3,4,5,6,7，C和E的1,2,10,11,12是PBS。这里最重要的条件是：C和E完全一样。
plate 2
Plate 2, C 和E的3，4,5,6,7,8,9，是样品8，9,10,11,12,13,14，C和E的1,2,10,11,12是PBS。这里最重要的条件是：C和E完全一样。
实验进行到第9步骤，就是加了1 N NaOH （100ul ），零下20度过夜。第二天要进行Laser test的时候，发现，
1. Plate 1, C的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH，不见了，而与之对应的Plate 1, E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在，而C和E的1,2,10,11,12的内的100ul 1 N NaOH还在。
2. Plate 2, C的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH，不见了，而与之对应的Plate 2, E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在，而C和E的1,2,10,11,12的内的100ul 1 N NaOH还在。
这消失的100ul 1 N NaOH，去了哪里？
假如是serum的区别，就是C和E的1,2,10,11,12的内的100ul 1 N NaOH还在（就是PBS还在，而serum不在了），那么，为什么, E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在？而C的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH消失了呢？
这里一个重要的信息是，剩余的 1 N NaOH几乎是100ul，而消失的1 N NaOH的plate孔，很干净，几乎看不见任何液体。
这凭空消失的条件是什么？关键是与之完全对应的E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在.
